Kromatogram cecair super pantasProminenece UFLC

Analisis cepat telah digunakan sebagai topik teknikal yang penting, tetapi dengan populariti LCMS yang cepat, peningkatan prestasi kos menjadi isu yang mendesak dan menjadi faktor penting untuk mempercepat.
Analisis cepat adalah masa analisis yang lebih singkat dan biasanya dicapai dengan memperpendek tiang kromatografi atau meningkatkan aliran fase aliran. Walau bagaimanapun, dengan menggunakan tiang pengisian saiz zarah 5μm yang biasa digunakan, prestasi pemisahan menggunakan mana-mana kaedah akan menurun dengan ketara, menjadikan pemajuan tidak bermakna.
Oleh itu, dua kaedah berikut telah dibangunkan:
• Menggunakan bahan pengemasan saiz zarah kecil
Dengan kaedah ini akan memungkinkan pemisahan yang cepat. Walau bagaimanapun, kerana peningkatan rintangan aliran dalam tiang kromatografi, tekanan yang ditahan oleh pelbagai komponen instrumen dan tiang kromatografi juga akan meningkat dengan ketara.
• Pemisahan suhu tinggi
Suhu yang lebih tinggi boleh mempercepatkan penyebaran bahan, mengurangkan rintangan aliran dalam tiang kromatografi dan memungkinkan pemisahan yang cepat. Analisis suhu tinggi sangat berkesan dalam mengurangkan tekanan lajur, tetapi suhu tinggi menyebabkan kerosakan lajur kromatografi, menyebabkan pemecahan sampel dan kekurangan lain perlu menarik perhatian apabila digunakan.
Untuk menyelesaikan masalah tekanan belakang, alat khusus yang meningkatkan keupayaan tekanan telah dibangunkan, dan alat-alat ini biasanya lebih mahal. Walau bagaimanapun, instrumen khusus ini terpaksa membuat kompromi dalam prestasi sampel dan kepekaan. Dan, pengisi terlalu halus pengisi tiang, untuk keperluan perkakasan yang tinggi, menggunakan kaedah analisis yang dibangunkan dengan tiang kromatografi ini mengorbankan penyebaran. Oleh itu, jika alat ini digunakan dalam analisis HPLC biasa, kecekapan akan menjadi lebih rendah.
Prominence menyokong pemisahan cepat
Prominence menggunakan komponen standard yang memenuhi keperluan penyelidik untuk analisis tradisional dan analisis kelajuan tinggi, dan juga menyokong suhu operasi sehingga 85 ℃, yang memungkinkan analisis cepat di bawah tekanan yang lebih rendah, sementara prestasi analisis dan tahap aliran yang ditunjukkan oleh instrumen ini tidak biasa walaupun dalam konfigurasi instrumen yang lebih mahal.
Prominence UFLC menyokong analisis cepat dengan ciri-ciri berikut:
• Tiub tiang kecil dan kolam peredaran dengan jumlah kecil mengurangkan kesan lebar puncak luar tiang.
• Gunakan Shim-pack XR-ODS dengan saiz zarah 2.2μm.
Shim-pack XR-ODS adalah generasi baru lajur kromatografi analisis cepat yang mempertimbangkan masalah halus pengisi di atas dan dengan bijak mencari keseimbangan dari hubungan kecekapan pemisahan dan tekanan yang meningkatkan atau mengekalkan kesan pemisahan sambil mengurangkan masa analisis.

Chromatographic conditions; column: described above, mobile phase: water/acetonitrile (3/7,v/v), flow rate: described above, temperature: 40 ℃, detection: absorbance at 245 nm, sample volume: 4μL(XR-ODS), 10μL(VP-ODS).
Peaks; 1: actophenone, 2: propiophenone, 3: butyrophenone, 4: balenophenone, 5: hexanophenone, 6: heptanophenone, 7: octanophenone.
• Prominence SIL-20A Autosampler mencapai sampel ultra-cepat 10 saat 10 μl.

Chromatographic conditions; column: Shim-pack XR-ODS(3mm i.d.×30 mm, 2.2μm), mobile phase: water/acetonitrile(4/6 to 2/8 in 0.4 min, convex gradient), flow rate: 3mL/min, temperature: 80 ℃, detection: absorbance at 245 nm, sample volume: 4μL(each 800 nm ol),.0.1 min delayed injection.
Peaks; 1: actophenone, 2: propiophenone, 3: butyrophenone, 4: balenophenone, 5: hexanophenone, 6: heptanophenone, 7: octanophenone.
• Menyokong analisis suhu tinggi sehingga 85 ℃.
Suhu dan analisis cepat: dengan suhu tiang meningkat, bilangan papan menara teori meningkat, kesan tiang meningkat, tekanan tiang berkurang.

Chromatographic conditions;
mobile phase:　water/acetonitrile (3/7, v/v),
detection: absorbance at 245 nm.
Puncak: 1: phenylene 2: phenylene 3: phenylene 4: phenylene 5: phenylene 6: phenylene 7: phenylene
Kesan suhu pada sebatian: analisis suhu tinggi sangat berkesan dalam mengurangkan tekanan tiang, tetapi suhu tinggi menyebabkan kerosakan tiang kromatografi, menyebabkan pemecahan sampel dan kekurangan lain yang perlu diperhatikan apabila digunakan. Analisis suhu tinggi hanya digunakan sebagai alat bantuan untuk analisis cepat.
• Pengesan dengan frekuensi sampel yang tinggi untuk mendapatkan data yang cepat tanpa kehilangan maklumat.
• Perisian penukaran kaedah kromatografi khusus yang memudahkan penukaran keadaan kromatografi biasa kepada keadaan UFLC dan memastikan kesepakatan kaedah analisis.

Kemungkinan mengulang analisis yang cepat
Kemudahan untuk mendapatkan masa pengekalan komponen dalam pemisahan cepat lebih sukar daripada dalam analisis biasa. Kebolehputaran masa simpanan (RSD) dan akar persegi masa meningkat sebaliknya, jadi prestasi penghantaran cecair yang lebih ketat diperlukan daripada analisis biasa. Prominence UFLC boleh menjamin penyerahan mikrostrok dengan resolusi penyerahan cecair 3nL / min, kecekapan penyerahan cecair yang luar biasa dengan 0.1 saat ketika penyerahan gradien, yang boleh memainkan kemampuan pengembalian masa simpanan yang sangat unggul.

Apakah aliran tinggi?
Matlamat kromatografi cecair cepat adalah aliran yang tinggi, iaitu lebih banyak sampel yang dianalisis setiap hari atau setiap jam. Untuk mencapai aliran yang tinggi, bukan sahaja masa analisis sampel individu dipersingkatkan, tetapi keseluruhan kitaran sampel dan masa analisis juga perlu dioptimumkan. Kegiatan untuk mempercepatkan bukan sahaja untuk mengurangkan masa analisis tetapi juga untuk mengurangkan kitaran analisis. Kelajuan suntikan sampel Prominence UFLC adalah 10 saat, yang membolehkan kitaran analisis menjadi lebih pendek.

Contoh aplikasi

Analisis UFLC Asid Amino PTC

Analisis asid amino mempunyai dua kaedah pengesanan, yang satu adalah kaedah derivatif selepas tiang selepas pemisahan tiang kromatografi pertukaran ion untuk pengesanan semula derivatif, yang lain adalah kaedah derivatif pra-tiang selepas derivatif pertama, menggunakan tiang kromatografi fase terbalik untuk pemisahan. Dari perspektif analisis cepat, kaedah derivatif pra-tiang berkesan. Di sini, analisis asid amino dilakukan dalam masa yang lebih pendek menggunakan Shim-pack XR-0DS.
Pengeluaran menggunakan phenyl isocyanate. Kaedah derivatif pasca-tiang mengambil masa 1 jam, dan analisis 25 minit yang diperlukan apabila kaedah derivatif pra-tiang menggunakan tiang kromatografi biasa boleh dikurangkan kepada 4 minit.

Analisis UFLC Pigment

Pewarna yang ditambahkan ke dalam makanan mempunyai sebatian sintetik dan sebatian semulajadi yang sangat larut dalam air dan dianalisis dengan HPLC. Tetapi masa yang diperlukan untuk menganalisis pada masa yang sama apabila kombinasi pelbagai pewarna dibuat. Di sini terdapat contoh analisis serentak pigmen yang dilakukan menggunakan Shim-pack XR-ODS Ultra Fast LC. Hasil analisis serentak 12 pewarna komponen adalah seperti kromatogram berikut. Masa analisis yang diperlukan dengan LC biasa adalah 50 minit, manakala dengan LC ultra-cepat, analisis dibuat kira-kira 6 minit.

Analisis UFLC untuk hidrokarbon aromatik polisiklik (PAH)

PAH adalah bahan kimia yang menentukan tahap pencemaran atmosfera oleh gas buangan seperti kenderaan. PAH adalah karsinogen yang kuat, jadi pemantauan atmosfera bahan-bahan ini adalah projek pengukuran yang penting. PAH menunjukkan fluoresensi yang kuat dan boleh digunakan untuk analisis sensitiviti tinggi dengan pengesan fluoresensi.
Untuk analisis 10 PAH ini, tanpa keadaan pemisahan kehilangan, UFLC mencapai analisis dipercepatkan 10 kali lebih cepat (masa analisis 5 minit) berbanding dengan LC biasa (masa analisis 50 minit).